大鼠膜聯蛋白A1(ANXA1)elisa試劑盒

大鼠膜聯蛋白A1(ANXA1)elisa試劑盒

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       ELISA方法的基本原理是：①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體，這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測定時，把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他物質分開，zui后結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化變為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據顏色反應的深淺刊物定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高，故可極大地地放大反應效果，從而使測定方法達到很高的敏感度。因此，ELISA檢測是一項定位、定性和定量(敏感度可達每毫升ng~pg水平)的綜合技術。常用的酶是辣根過氧化物酶(HRP)和堿性磷酸酶(AKP)

ELISA樣本準備及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。

2. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

大鼠膜聯蛋白A1(ANXA1)elisa試劑盒

操作注意事項：

● 試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。

● 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。

● 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

● 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

● 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

● 底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

● 加入試劑的順序應*，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

● 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

試劑盒小貼士

1. 在收到試劑盒后，為保證檢測效果，需要根據說明書中保存條件正確儲存。除非特別注明，試劑盒大多是在2～8°C條件下儲存

2. 在實驗進行前，請確認包裝中的試劑盒成分與說明書一致，再進行后續操作

3. 溶解標準品過程中，注意標準品是否受潮，過程中要避免產生泡沫

4. 為了避免交叉污染，配置不同濃度標準品、上樣、加不同試劑都需要換槍頭。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽

5. 每次孵育時，正確使用封板膠紙可保證結果的準確性

6. 正確洗板有助于實驗結果的穩定性

7. TMB顯色底物在上板前應為無色，請避光保存。加入孔板后，將由無色變成不同程度的藍色

8. 終止液上板順序需與底物上板順序一致，加入終止液，溶液顏色由藍色變為黃色。如果出現綠色，即表明終止液與底物未混勻，請充分混合

 深圳瑞清生物信息科技有限公司經過數年的努力發展已迅速成為集產品研發、經營為一體的專業化生物工程公司。公司具有完善的實驗技術開發平臺，成熟的抗原、抗體研發系統，熟練掌握各種酶聯技術，結合公司的研發團隊，可以有效的保證公司產品強的穩定性和高的準確性，同時又具有競爭力的價格。 公司主營ELISA試劑盒，目前可以提供生化試劑、分子生物學試劑及試劑盒，各種抗體及免疫學試劑盒、實驗耗材等多門類上萬種產品，產品涉及分子生物學、細胞生物學、免疫學等生命科學的各個領域。

免責聲明

1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。

2. 嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。